Преподобный Иов (в миру Иван Железо) родился в середине XVI века в Покутье, в пределах исторической Галиции. С десяти лет он вступил в монашеское поприще, придя в Преображенский Угорницкий монастырь, а уже в двенадцать лет принял монашество. Юные годы будущего подвижника были ознаменованы глубокой верой, усердием в постнической жизни и стремлением к духовному совершенству. В раннем возрасте он был удостоен священнического сана.
Около 1580 года по просьбе князя Константина Острожского, активного защитника Православия, преподобный был поставлен настоятелем Крестовоздвиженского монастыря, расположенного недалеко от города Дубно. В течение более двадцати лет он нес это послушание в условиях возрастающих гонений со стороны униатов и католиков, оставаясь твёрдым в православной вере и преданным своему пастырскому служению.
В начале XVII века преподобный Иов удалился на Почаевскую гору, где поселился в пещере рядом с древней Успенской обителью, славящейся чудотворной иконой Божией Матери. Подвижническая жизнь святого произвела глубокое впечатление на братию монастыря, и вскоре они единодушно избрали его своим игуменом.
Будучи настоятелем Почаевской обители на протяжении пятидесяти лет, преподобный Иов сочетал духовную твёрдость с кротостью и добротой пастыря. Он не только возглавлял монастырское устроение, но и лично трудился: сажал деревья в монастырском саду, укреплял плотины, заботился о братии. Его глубоко молитвенная жизнь, сопряжённая с непрестанным деланием Иисусовой молитвы, свидетельствовала о подлинном духовном горении.
В 1628 году преподобный Иов принял участие в Киевском Соборе, направленном против унийных притязаний, подтверждая свою приверженность верности каноническому Православию и заботу о защите русской духовной традиции. После 1642 года он принял великую схиму с именем Иоанн..
Ученик преподобного Иова, инок Досифей, оставил в житии святого свидетельство о том, что однажды во время молитвы в пещере её осиял небесный свет.
Преподобный Иов почил в 1651 году, прожив более ста лет. Его кончина ознаменовала завершение земного подвига человека, всю жизнь посвятившего Богу и Церкви. Спустя восемь лет, 28 августа 1659 года, было совершено его прославление в лике преподобных.